層流手術室日常監測，空氣采樣方法說明

層流手術室空氣日常監測方法說明:
       要求日常實行動態監測，必測項目為平板采樣法（沉降法）或采樣器法(浮游菌法)檢測細菌菌落總數。
    （1）回風口動態平板采樣法：應在手術開始、手術2小時、手術結束前抽檢3-4次。每個回風口中部擺放3個傾斜30℃，Φ90 培養皿，暴露30分鐘后，37°C培養24小時。
     標準：每皿菌落計數平均值應符合表4標準要求。單皿最大值不應超過平均值3倍。
    （2）動態采樣器法：浮游菌菌落檢測應在手術進行如切皮、縫合、連臺手術之間、手術進行4小時等，選擇不少于3個程序，測定細菌菌落總數。
   標準：I級<30cfu/m3 ；II級<150 cfu/m3；III級<450 cfu/m3；IV級<500 cfu/m3。
    （3）其他潔凈用房在當天上午10時和下午4時各測1次，在每個回風口中部擺放3個Φ90培養皿，沉降0.5h后在37℃下培養24h。
    標準：同回風口動態平板采樣法標準。

層流手術室靜態（空態）時空氣采樣方法：
   1、采樣方法：
    （1）當送風口集中布置時，應對手術區和周邊區分別檢測；當送風口分散布置時，按全室統一布點方法檢測。
    （2）沉降法采樣時，用直徑9cm的培養皿，在空氣中暴露30min，37℃培養24h，培養皿中的菌落數（cfu）代表空氣中沉降下來的細菌數，以個/皿表示。
    （3）浮游法采樣時，用裂隙采樣器在空氣中隨機采樣30min，對采樣皿或采樣條培養得出的菌落數（cfu），代表空氣中浮游下來的細菌數，以個/m3表示。
    2、采樣高度：
    （1）采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；
    （2）在手術區檢測時應無手術臺；當手術臺已固定時，檢測高度應在臺面之上0.25cm。
    3、布點方法：（見表1）
    4、采樣注意事項：
    （1）在100級區域檢測時，采樣口應對著氣流方向；在其他區域檢測時，采樣口均向上；
    （2）采樣后的培養基條或培養皿，應37℃條件下培養24h，并計算菌落數，菌落數的平均值均四舍五入選位到小數點后1位；
    （3）當采用浮游法測定浮游菌濃度時，細菌濃度測點數應和被測區域的含塵濃度測點數相同，且宜在同一位置上。每次采樣應滿足表8的最小采樣量的要求，每次采樣時間不應小于30分鐘。
    （4）當用沉降法測定沉降菌濃度時，細菌濃度測點數即要不少于含塵濃度測點數，應滿足表9規定的最少培養皿數的要求（不含對照皿）。如沉降時間適當延長，則最少要求培養皿數可按比例減少，但不能少于含塵濃度的最少測點數。
    （5）不論用何種方法檢測細菌濃度，都必須有兩次空白對照。第一次用于檢測培養皿或培養基條（每批一個對照皿（條））；第2次對操作過程做對照試驗（每室或每區將1個對照皿（條），打開后又立即封蓋，進行模擬操作）；兩次對照結果必須為陰性，整個操作過程應符合無菌操作的要求。
    （6）新房驗收時，應最后做空氣、物表細菌檢測。
   
表1  潔凈手術室空氣采關布點位置與方法


區域                                     最少測點數                              手術區圖示
Ⅰ級  潔凈手術室                5點（雙對角線布點）
手術區和潔 凈輔助用房        8點（每邊內2點）
局部100級區
Ⅰ級  周邊區   

Ⅱ～Ⅲ級  潔凈手術             3點（單對角線布點）                       集中送風面正投影區
室手術區                             6點（長邊內2點，短邊內1點）         集中送風面正投影區      
Ⅱ級      周邊區                   4點（每邊內1點）
Ⅲ級      周邊區  

Ⅳ級潔凈手術室及分散         4點（避開送風口正下方）   
布置送風口的潔凈室面         2點（避開送風口正下方）     
積＞30㎡
面積≤30㎡  
注：分布在集中送風面正投影區角的采樣點距離鄰近兩邊的距離位0.12米

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